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Vacunas Recombinantes (página 3)




Enviado por Pablo Turmero



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Estrategias de inmunización
Es ventajoso combinar 2 o más tipos de vacuna (se administra 1 o más dosis de la 1ª vacuna seguida de 1 o más dosis de la 2ª).

Estrategia ideal :Inmunizar primero con vacuna de ADN y después administrar una vacuna de subunidades como recuerdo.

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El resultado final de la respuesta inmune puede verse influido por:

Modo de administración.
Dosis (número, tamaño y frecuencia).
Adyuvantes.

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Modo de administración

Múltiples rutas de inoculación:

Intramuscular.
Subcutánea.
Intraperitoneal.
Intradérmica.
Intravenosa.
Oral.
Rectal.
Vaginal.
Intraorbital.
Intratraqueal.
Intranasal.

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Administración vía inyección con aguja (parenteral) o vía métodos biolísticos con pistola de genes.

La pistola de genes garantiza una mayor eficiencia, porqué hace que ADN penetre al interior de la célula, además también representa un ahorro porqué se necesitan dosis hasta 100 veces menores.

La administración parenteral es menos eficaz porqué se queda en medio intersticial (es decir desprotegida frente a nucleasas).

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Dosis
El número de dosis afecta la respuesta inmune (generalmente, se necesita > 1 inmunización para obtener respuesta lo suficientemente fuerte como para ser protectora).

El intervalo entre las dosis resulta crítico (al aumentarlo aumenta la respuesta inmune conferida por la vacuna).

La cantidad; depende de diferentes factores:

Tamaño del individuo.
Inmunogenicidad del antígeno utilizado.
Eficiencia de transfección durante la administración.

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Adyuvantes
Selección en función del tipo de respuesta inmune que busquemos.

Existen diferentes tipos:
Adyuvantes químicos (hidróxido de aluminio).
Adyuvantes genéticos (consisten en coinmunizar con un gen estimulatorio).
Adyuvantes que potencian la inmunidad mucosal (toxina lábil de E.coli mutante, IL proinflamatorias,…)

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El MECANISMO DE ACCIÓN se resume en :
Inmunización con un plásmido que contiene la información genética de uno o varios genes que codifican para proteínas inmunogénicas de determinado patógeno.
El plásmido actúa como un vector permitiendo la expresión en el interior de las células que son transfectadas por la inmunización.
La respuesta inmune generada (humoral o celular), ayuda a contrarrestar una infección con el patógeno, por tanto es una buena herramienta de profilaxis, sobre todo en las enfermedades (como las virales) que requieren ambas ramas de la respuesta inmune.

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Mecanismos de presentación antigénica
Existen al menos tres que garantizan la inducción de una respuesta inmune:

Estimulación directa mediada por células somáticas (miocitos, queratinocitos o cualquier célula MHC II negativa).
Transfección directa de APC.
Presentación cruzada (Cross-priming), donde el plásmido transfecta una célula somática y/o APC, y la proteína secretada es captada por otra APC donde es procesada para su presentación a linfocitos T CD8+ .

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Mecanismos de respuesta inmune
Inmunidad HUMORAL frente a numerosas proteínas en diversas especies.
La respuesta es menor que la obtenida con virus vivo a dosis subletales y el pico de anticuerpos es más tardío (no es desventaja, porqué al ser vacunas de ADN pueden generar respuesta de memoria).

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Inmunidad CELULAR vía LT CD4+ cooperadores .
Si se administra vía IM, el carácter proinflamatorio de los motivos CpG no metilados del ADN bacteriano induce síntesis y excreción de IL-12 y por tanto una respuesta Th-1.
Si se administra con pistola de genes, se genera una respuesta de tipo Th-2.

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Inmunidad CELULAR vía LT CD8+ citotóxicos, es una de las principales ventajas de las vacunas de ADN porqué es difícil de inducir con las vacunas convencionales.

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Inmunidad MUCOSAL, es decisiva en la protección contra los microorganismos invasores, ya que la mayoría de patógenos veterinarios se transmiten a través del epitelio de los tractos respiratorio, gastrointestinal y genital.
Las estructuras linfoides asociadas a estas mucosas, tienen epitelio con células especializadas que transportan el antígeno intacto desde la membrana apical expuesta hasta la superficie basolateral donde el antígeno interactúa con la APC y se inicia la estimulación de la respuesta mediada por LT y LB.

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Memoria inmunitaria
Esta respuesta depende del tipo de antígeno empleado en la vacuna.
Existen varias posibilidades para explicarla :
El antígeno está presente continuamente a bajos niveles (suficientes para la presentación antigénica pero por debajo del límite de detección) o bien el ADN no se detecta pero el antígeno sintetizado pudiera persistir in vivo, proporcionando así un reservorio para mantener la respuesta inmune
El plásmido y el antígeno sintetizado desaparecen y las respuestas observadas son antígeno-independientes.
Las células memoria generadas por esta vacunación son cualitativamente diferentes de las inducidas por otros tipos de vacuna.

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VACUNAS COMERCIALIZADAS

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Vacuno
(1997) Vacuna contra virus sincitial respiratorio bovino, a partir del gen que codifica para la proteína G del virus; se ha comprobado que la vacunación intradérmica sin aguja confiere mayor protección que la intramuscular o intradérmica con aguja.
(1999)Vacunas contra IBR-1 (virus de rinotraqueitis infecciosa bovina 1), a partir del gen de la glicoproteína D del virus (con o sin región transmembrana) ; protege aunque en general el título de anticuerpos que se obtiene no es elevado (ni se incrementa con un aumento del número de dosis); además también protege a terneros recién nacidos con nivel detectables de anticuerpos calostrales.
(1999) Vacuna contra BVDV (virus de la diarrea viral bovina), a partir de la proteína E2 del virus, clonada en un vector de ADN. Se ha demostrado que su administración por vía intramuscular en solución salina o en liposoma, induce respuesta de anticuerpos neutralizantes y respuestas linfoproliferativas específicas a este antígeno.

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Porcino
(1996) Vacuna contra la pseudorrabia, a partir del gen clonado de la glicoproteína D del virus, con la que se ha podido obtener grandes resultados en lechones de 1 día provenientes de madres no vacunadas y sin AC anti-virus de la pseudorrabia.

(1997) Vacuna contra la pseudorrabia, a partir del gen de la glicoproteina C, con la que se ha podido conseguir protección en animales de más de 1 día.

(2001) Vacuna contra virus de gastroenteritis transmisible, a partir del gen que codifica para la glicoproteína S, utilizando como vector el serotipo 5 de adenovirus (se obtiene respuesta inmune de AC neutralizantes a los 6-7 días post-inoculación).

(2005) Vacuna contra la PPC, a partir del gen de la glicoproteína E2 del virus, con la que se ha obtenido protección total frente al desafío letal (los animales desarrollaron una marcada respuesta de LT cooperadores, y una rápida elevación de los niveles de AC neutralizantes, lo que se correlacionó con la protección ante los síntomas clínicos y la infección viral ).

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Aves
(1993) Vacuna contra la influenza aviar, a partir del gen de la hemaglutinina viral , donde la administración de 2 dosis de 100 µg cada una separadas 1 mes entre sí, confirió protección ante el desafío 1-2 semanas después de la segunda dosis.

(1996) Vacuna contra la enfermedad de Newcastle, a partir del gen clonado que codifica para la proteína F del virus ( con la peculiaridad que tan sólo los animales vacunados con ADN lineal obtuvieron la protección deseada; lo cual avala el hecho de que la inducción de inmunidad mucosal en el modelo de infección por este virus, resulta decisiva).

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Equino
(2003) Vacuna contra Influenza Equina y Tétanos , a partir de Virus canaripox recombinante Influenza A equina; se utiliza en Inmunización activa ( efectos visibles 14 días después) de los caballos de > 4 meses contra la influenza equina para la reducción de los signos clínicos y de la excreción vírica después de la infección y contra el tétanos para prevenir la mortalidad, su efecto dura 5 meses después de la primera vacunación y 1 año después de la tercera vacunación.

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Gatos y perros
(1997) “Recombitek” (vacuna contra moquillo canino),a partir de canarypox inocuo donde se ha implantado material genético de vmc, con esta vacuna se ha conseguido evitar todos los problemas post-vacunales típicos de las vacunas tradicionales.
(2005)“Purevax FelV” (vacuna contra la leucemia felina),a partir de canaripox recombinante que expresa los genes env y gag del FeLV-A (en condiciones de campo, tan sólo subgrupo A es infeccioso y la inmunización frente a este subgrupo induce una protección total contra los subgrupos A, B y C, porqué después de la inoculación, el virus expresa las proteínas protectoras, pero sin replicarse) y consigue inducir inmunidad contra la leucemia felina.

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